公开(公告)号：CN115873812B

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202210904607.7

申请日：2022-07-29

Applicant: 上海应用技术大学

Inventor： 文丽瑛 ,  徐毅 ,  董海阳

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N15/85 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/66 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种适用于哺乳动物细胞表达系统的高活性和高热稳定性荧光素酶突变体。本发明在密码子优化的萤火虫荧光素酶基础上利用理性设计的方法改造荧光素酶的分子结构，得到热稳定性和活性均提高的荧光素酶突变体，其突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3‑5所示。编码其蛋白质的核苷酸序列如SEQID NO.6‑8所示。突变体包括双突变位点T214N T290P、T214N K28R和A532RT214N中的至少一个。本发明获得的荧光素酶突变体，相比现有技术，其在293细胞中能够高效表达，并且表达产物具有高活性和高热稳定性的特点。

公开(公告)号：CN115873812A

公开(公告)日：2023-03-31

申请号：CN202210904607.7

申请日：2022-07-29

Applicant: 上海应用技术大学

Inventor： 文丽瑛 ,  徐毅 ,  董海阳

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N15/85 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/66 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种适用于哺乳动物细胞表达系统的高活性和高热稳定性荧光素酶突变体。本发明在密码子优化的萤火虫荧光素酶基础上利用理性设计的方法改造荧光素酶的分子结构，得到热稳定性和活性均提高的荧光素酶突变体，其突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.3‑5所示。编码其蛋白质的核苷酸序列如SEQID NO.6‑8所示。突变体包括双突变位点T214N T290P、T214N K28R和A532RT214N中的至少一个。本发明获得的荧光素酶突变体，相比现有技术，其在293细胞中能够高效表达，并且表达产物具有高活性和高热稳定性的特点。