基于免疫荧光技术的检测和定位花粉致敏原蛋白的方法

    公开(公告)号:CN105929174A

    公开(公告)日:2016-09-07

    申请号:CN201610277279.7

    申请日:2016-05-01

    Applicant: 上海大学

    CPC classification number: G01N33/6893 G01N33/582 G01N2800/24

    Abstract: 本发明涉及一种基于免疫荧光技术的检测和定位花粉致敏原蛋白的方法。该方法以花粉过敏IgE阳性血清作为抗体,利用生物素标记的抗人IgE抗体可特异性地识别IgE,Alexa Flour 488标记的链霉亲和素能与生物素特异结合,通过抗原抗体的特异结合以及对信号的级联放大效应,能使花粉中微弱的致敏原信号被凸现出来,以利于用激光共聚焦显微镜(LSM710)对花粉致敏原蛋白的相关荧光信号进行检测和定位。便于在花粉颗粒上直观地观察其致敏原的分布、强弱情况。本发明为研究花粉中致敏蛋白的识别,定位提供了更为直观有效的方法。所获得数据可以为分析致敏蛋白的分布特征,了解其致敏特性,为防治人群花粉症的频发提供科学数据。

    类受体蛋白激酶合成基因ERECTA第27个外显子单碱基突变的快速检测体系及检测方法

    公开(公告)号:CN103993077A

    公开(公告)日:2014-08-20

    申请号:CN201410187519.5

    申请日:2014-05-06

    Applicant: 上海大学

    CPC classification number: C12Q1/6858 C12Q2531/113

    Abstract: 本发明涉及一种类受体蛋白激酶合成基因ERECTA第27个外显子单碱基突变的快速检测体系及检测方法。其主要的特征在于该体系以水为溶剂,体系如为:ddH2O,11.7μl;10xBuffer,1.5μl;dNTP,0.2μl;erecta-MF,0.2μl;erecta-WF,0.2μl;erecta-R,0.2μl;TaqDNA聚合酶,0.2μl;模板DNA,0.2μl。所述的erecta-MF为第一对特异正向引物:5’-GACATTTGAAGGGATCTTTT-3’,所述的erecta-WF为第二对特异正向引物:5’-GACATTTGAAGGGATCTTTC-3’,所述的erecta-R为反向引物:5’-AAGCTCTTCTGGAATTGGG-3’。该检测体系及方法低成本、简便、快捷的分子生物学检测手段,为利用分子标记进行拟南芥的标记提供了有效的技术手段。

    花药特异性表达载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN103146747A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201310056748.9

    申请日:2013-02-22

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种花药特异性表达载体及其构建方法。该表达载体为SEQIDNO1所示的碱基序列。本载体可以在拟南芥花药中特异表达,且表达部位为花药绒毡层。利用该载体表达特点可以为花药绒毡层发育、基因表达模式、基因花药特异性表达及沉默等生物学研究提供便利。

    乙酰辅酶A合成酶基因第四外显子单碱基突变的快速检测体系及检测方法

    公开(公告)号:CN102140508A

    公开(公告)日:2011-08-03

    申请号:CN201010599548.4

    申请日:2010-12-22

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种乙酰辅酶A合成酶基因ATMS1第四外显子单碱基突变的快速检测体系及检测方法。该检测体系以水为溶剂,其组成及浓度为:10Xbuffer(15mM/Mg2+)1.5mM/Mg2+、dNTP0.333mM、MF0.133µM、WF0.133µM、R0.133µM、内参0.133µM、TaqDNA聚合酶0.067、模板DNA 150ng/µl。所述的MF为第一对特异正向引物:5’-AGCCAATGTGTAATGCAAGA-3’,所述的WF为第二对特异正向引物:5’-AGCCAATGTGTAATGCAAGG-3’所述的内参正向引物为:5’-AGTTGAAGCTTTTCCAATAGGT-3’所述的反向引物R为:5’-TGGACGGCTCTAACCTTC-3’。该检测方法简便、快捷、低成本的分子生物学检测方法,为利用分子标记进行拟南芥的标记提供了有效的技术手段。

    带有荧光标签的植物表达载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN104152486A

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201410187618.3

    申请日:2014-05-06

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种带有荧光标签的植物表达载体及其构建方法。该载体为SEQIDNO.1所示的碱基序列。本载体采用在植物体内不同组织器官和不同的发育时期表达最为稳定的UBQ10启动子作为表达载体的启动子,并添加GFP为本载体的报道基因,便于在植物体内更快捷的观察目的蛋白在植物中的表达情况,为生物学研究提供便利。

    水稻温敏雄性不育基因、其编码蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN102121017A

    公开(公告)日:2011-07-13

    申请号:CN201010599409.1

    申请日:2010-12-22

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种水稻温敏雄性不育基因、其编码蛋白及其应用。该基因具有下列核苷酸序列之一:1.具有SEQIDNO1所示的核苷酸序列,2.与SEQIDNO3所示的拟南芥基因的碱基序列的同源性最高,期望值达到1.8e-27,且编码相同生物学功能蛋白质的DNA序列。本发明的基因OsATMS1的转录表达具有对环境温度敏感的特性,能够使植物雄性育性具备温敏特征,预示着它在作物杂交育种以及产量提高方面的应用价值。

    植物花药中响应光周期基因的筛选方法

    公开(公告)号:CN102121001A

    公开(公告)日:2011-07-13

    申请号:CN201010599864.1

    申请日:2010-12-22

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种植物花药中响应光周期基因的筛选方法。该方法的具体步骤为:根据国外公开的芯片数据获取待筛选植物的花药特异表达基因;在其它所有条件相同的前提下,分别于长光照周期和短光照周期下培养待筛选植物,待植物抽薹后2天,对其花药分别提取mRNA;将提取的长短日照下两组mRNA分别制作全基因组表达谱芯片,找出表达有显著差异的基因;将所得表达有显著差异的基因与待筛选植物的花药特异表达基因对比,得到该植物花药中响应光周期基因。本发明不需要用到EMS这类剧毒致癌物质;只需用到240-300粒拟南芥种子即可,无需大批量种子来完成实验;周期短,只需种植一代植物即可完成。本发明中的方法,即使没有任何表型的基因,也可以全部筛选到。

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