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公开(公告)号：CN102344909B
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201110321182.9
申请日：2011-10-20
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
IPC: C12N5/076
Abstract: 本发明属于生物工程领域，提供了一种分离人精原干细胞的方法，包括机械分离睾丸组织，将睾丸组织加工成半液态，然后在半液态的睾丸组织中加入消化酶液I，将睾丸组织消化成单个的曲细精管，还包括在曲细精管中加入消化酶液II的步骤，将曲细精管消化为单个细胞，还包括将单个细胞中的生殖细胞和支持细胞分离的步骤，还包括采用免疫磁珠细胞分选术分离GPR125阳性精原干细胞和GFRA1阳性精原干细胞的步骤，还包括采用免疫细胞化学法鉴定分离的GPR125阳性精原干细胞和GFRA1阳性精原干细胞的步骤。本发明的方法能获得纯度高、数量多的人精原干细胞，为人精原干细胞的研究及在生殖医学和再生医学中的应用提供了充足的细胞来源。
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公开(公告)号：CN103558204A
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201310408674.0
申请日：2013-09-10
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
IPC: G01N21/65
Abstract: 本发明涉及一种生精小管拉曼光谱峰及鉴别生精小管生精功能的方法。具体提供一种用于鉴别非梗阻性无精子症和梗阻性无精子症的生精小管拉曼光谱峰，所述的拉曼光谱峰可用于鉴别非梗阻性无精子症和梗阻性无精子症的生精小管，并在非诊断和治疗目的地评估生精小管生精功能中的应用。本发明还提供一种拉曼光谱无损性检测人类生精小管中蛋白质的差异，评估生精小管生精功能的方法。本发明优点是：提供了用以评估生精小管生精功能的拉曼光谱，其判定结果准确可靠、可信度高，该方法无需对生精小管进行特殊处理且损伤可被控制在极低的程度，并可直接用于后续的研究或辅助生殖治疗。
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公开(公告)号：CN102337285A
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN201110326935.5
申请日：2011-10-25
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
Abstract: 本发明公开了一种含HIhh的逆转录病毒载体和病毒颗粒及其应用。所述的含HIhh的逆转录病毒载体是将XhoI与NotI双酶切重组载体pCIG-HIhh-IRES-EGFP获得的含HIhh片段，与XhoI与NotI双酶切逆转录病毒载体pSFG获得的大片段连接，经转化，酶切鉴定，测序制备得到的，所述的含HIhh的逆转录病毒颗粒是通过含HIhh的逆转录病毒载体转染包装细胞系293GPG制备的。本发明还涉及上述逆转录病毒载体和逆转录病毒颗粒在制备治疗骨缺陷药物中的应用。本发明的优点在于为骨组织工程解决早期血管化问题提供了一种新方法，为治疗骨缺陷疾病提供了一种新途径。
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公开(公告)号：CN102293689A
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN201110211722.8
申请日：2011-07-27
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
Abstract: 本发明涉及一种纳米银睾丸假体，所述的睾丸假体为硅胶睾丸假体，所述睾丸假体外表面涂布纳米级Ag-SiO2颗粒，所述的Ag-SiO2颗粒中SiO2和银的质量比为5:1-2:1。本发明还提供这种睾丸假体的制备方法和应用。本发明优点在于：Ag+含量高，抗菌能力强，极大地降低了感染发生率，可以持久抗菌，无耐药性，避免出现反复感染，加快组织愈合，促进功能恢复；制备工艺简单且容易控制，节省成本，Ag+分布均匀、固定牢固，纳米级SiO2和纳米银产量较高，制备出的纳米银睾丸假体中纳米银分布均匀，不易脱落；既能满足患者在心理健康方面需要，又能起到很好的抗菌效果，在临床应用上有着很大的潜力。
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公开(公告)号：CN102293689B
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201110211722.8
申请日：2011-07-27
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
Abstract: 本发明涉及一种纳米银睾丸假体，所述的睾丸假体为硅胶睾丸假体，所述睾丸假体外表面涂布纳米级Ag-SiO2颗粒，所述的Ag-SiO2颗粒中SiO2和银的质量比为5:1-2:1。本发明还提供这种睾丸假体的制备方法和应用。本发明优点在于：Ag+含量高，抗菌能力强，极大地降低了感染发生率，可以持久抗菌，无耐药性，避免出现反复感染，加快组织愈合，促进功能恢复；制备工艺简单且容易控制，节省成本，Ag+分布均匀、固定牢固，纳米级SiO2和纳米银产量较高，制备出的纳米银睾丸假体中纳米银分布均匀，不易脱落；既能满足患者在心理健康方面需要，又能起到很好的抗菌效果，在临床应用上有着很大的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102288471A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110211736.X
申请日：2011-07-27
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明涉及一种悬浮细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，所述的染色方法包括以下步骤：先收集细胞于离心管中，800g离心收集细胞，然后分别加入多聚甲醛固定、Triton-X100通透、1%BSA封闭，再依次加入一抗、二抗孵育，以上每步操作后都采用800g离心的方法进行洗涤，最后DAPI染色后，滴至载玻片上封片观察。本发明优点在于：本发明的一种悬浮细胞的免疫荧光染色方法，免疫荧光染色的过程均在离心管中进行，避开了悬浮细胞难于爬片及试验过程容易脱落的问题，染色结果较好，对于悬浮细胞及难于贴壁的细胞，此方法十分适用。
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公开(公告)号：CN103698311A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201210368263.9
申请日：2012-09-28
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
IPC: G01N21/65
Abstract: 本发明涉及一种非侵入性精子形态和超微结构分析方法，包括以下步骤：运用色散型共聚焦拉曼光谱仪进行分析，选择激发拉曼光谱，将精子细胞置反射光镜下中，通过一定的激发功率和曝光时间可采集到精子细胞的化学基团光谱。分别对精子顶体、颈部、尾部大小划分扫描区域重复扫描三次，即可获得拉曼数据谱峰，分析其波形变化和位移；最后将采集到的精子形态的拉曼光谱，应用RRUFF拉曼数据库检索，得到精子形态各区域的拉曼光谱。本发明优点在于：本发明采用的激光拉曼光谱为一种非侵入性技术，它不需要任何染料和固定也能反映出每条精子不同个体超微结构、不同成分的散射物质的特性，对精子形态学分析提供了一个新的评估方法。
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公开(公告)号：CN103698310A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201210368194.1
申请日：2012-09-28
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
IPC: G01N21/65
Abstract: 本发明涉及一种精子顶体区拉曼光谱峰及其用途，所述的拉曼光谱峰如摘要附图所示，其可用于精子受精功能评估和检测以及精子理论研究。本发明还涉及一种精子受精功能评估方法，包括：a）制备精液涂片；b）在激光激发波为532nm，激光功率5mW扫描精液涂片上的单个精子顶体区至少三次，获得拉曼数据谱峰；c）将检测样本的拉曼数据谱峰与上述精子顶体区拉曼光谱峰对比，判断精子是否具备受精功能。本发明优点是：提供了判定精子受精潜能的标准拉曼光谱峰，其判定结果准确可靠、可信度高，因而可作为精子受精潜能检测的一种新方法，该方法可对单个精子进行操控，精子无须特殊处理且损伤可被控制在极低的程度，并可直接用于后续的研究或辅助生殖治疗。
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公开(公告)号：CN102288471B
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201110211736.X
申请日：2011-07-27
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明涉及一种悬浮细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于，所述的染色方法包括以下步骤：先收集细胞于离心管中，800g离心收集细胞，然后分别加入多聚甲醛固定、Triton-X100通透、1%BSA封闭，再依次加入一抗、二抗孵育，以上每步操作后都采用800g离心的方法进行洗涤，最后DAPI染色后，滴至载玻片上封片观察。本发明优点在于：本发明的一种悬浮细胞的免疫荧光染色方法，免疫荧光染色的过程均在离心管中进行，避开了悬浮细胞难于爬片及试验过程容易脱落的问题，染色结果较好，对于悬浮细胞及难于贴壁的细胞，此方法十分适用。
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公开(公告)号：CN102344909A
公开(公告)日：2012-02-08
申请号：CN201110321182.9
申请日：2011-10-20
Applicant: 上海交通大学医学院附属仁济医院
IPC: C12N5/076
Abstract: 本发明属于生物工程领域，提供了一种分离人精原干细胞的方法，包括机械分离睾丸组织，将睾丸组织加工成半液态，然后在半液态的睾丸组织中加入消化酶液I，将睾丸组织消化成单个的曲细精管，还包括在曲细精管中加入消化酶液II的步骤，将曲细精管消化为单个细胞，还包括将单个细胞中的生殖细胞和支持细胞分离的步骤，还包括采用免疫磁珠细胞分选术分离GPR125阳性精原干细胞和GFRA1阳性精原干细胞的步骤，还包括采用免疫细胞化学法鉴定分离的GPR125阳性精原干细胞和GFRA1阳性精原干细胞的步骤。本发明的方法能获得纯度高、数量多的人精原干细胞，为人精原干细胞的研究及在生殖医学和再生医学中的应用提供了充足的细胞来源。
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