公开(公告)号：CN1587416A

公开(公告)日：2005-03-02

申请号：CN200410052611.7

申请日：2004-07-08

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 邓子新 ,  孙宇辉 ,  周秀芬

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/76 ,  C12N15/65 ,  C12N15/11

Abstract: 一种适用于链霉菌染色体基因敲除的双功能科斯载体，其特征在于它由以下DNA元件组成：①包含来自大肠杆菌质粒CoIE1复制起始位点(ori)，②包含氨苄青霉素抗性基因(bla)，③包含来自链霉菌质粒pIJ101复制起始位点(ori)和复制子，④包含硫链丝菌素抗性基因(tsr)，⑤包含来自链霉菌质粒pIJ101的质粒强不相容区(sti)，⑥包含λ噬菌体科斯(cos)位点，⑦包含来自RP4的接合转移起始位点(oriT)，⑧包含可被T3和T7噬菌体RNA聚合酶特异性识别的启动子，⑨包含来自Tn5的不包含启动子的新霉素抗性基因(neo)。本发明可方便有效地用于链霉菌染色体基因敲除，同时包含有大肠杆菌质粒和链霉菌质粒复制子和抗性筛选标记，可同时在两种宿主进行自主复制和遗传的功能。

公开(公告)号：CN1587417A

公开(公告)日：2005-03-02

申请号：CN200410066203.7

申请日：2004-09-09

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 邓子新 ,  孙宇辉 ,  周秀芬 ,  贺新义

IPC: C12N15/76 ,  C12N15/11

Abstract: 一种适用于链霉菌染色体基因敲除的系列双功能科斯载体。包括pJTU390、pJTU391、pJTU407、pJTU408、pJTU409、pJTU410、pJTU411、pJTU412，由以下DNA元件组成：①包含来自大肠杆菌质粒CoIE1复制起始位点(ori)，②包含氨苄青霉素抗性基因(bla)，③包含来自链霉菌质粒pIJ101复制起始位点(ori)和复制子，④包含硫链丝菌素抗性基因(tsr)，⑤包含λ噬菌体科斯(cos)位点，⑥包含来自RP4的接合转移起始位点(oriT)，⑦包含可被T3和T7噬菌体RNA聚合酶特异性识别启动子，⑧包含来自Tn5的不包含启动子的新霉素抗性基因(neo)。本发明同时包含有大肠杆菌质粒和链霉菌质粒复制子和抗性筛选标记，同时在两种宿主进行自主复制和遗传的功能，方便地在大肠杆菌中进行体外遗传操作和在链霉菌中进行基因功能分析研究。