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公开(公告)号：CN101381682A
公开(公告)日：2009-03-11
申请号：CN200810201630.X
申请日：2008-10-23
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种玉米弯孢菌萌发分生孢子遗传转化的方法，以玻片悬浮法培养玉米弯孢菌萌发分生孢子为受体，用含真菌转化载体系统的农杆菌与萌发分生孢子共培养，然后在抗生素培养基上筛选出具有抗性的转化子。该体系以玉米弯孢菌为始发菌，在PDA培养基上培养5－7天后用0.9％生理盐水刮下孢子，然后用玻片悬浮培养法使之萌发后，用于农杆菌感染。感染后的萌发分生孢子经共培养、抑菌培养和连续2代的抗选择剂筛选培养，获得抗性转化子，以此构建玉米弯孢菌突变体库，为筛选弱致病性和致病缺陷性弯孢菌株提供了丰富的筛选菌源，同时还可用于克隆玉米弯孢菌致病性相关基因，为深入研究玉米弯孢菌菌株致病机理奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101328465A
公开(公告)日：2008-12-24
申请号：CN200810041218.6
申请日：2008-07-31
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种玉米弯孢叶斑病菌突变菌株的构建方法，取新月弯孢霉菌种扩大培养后配制成原生质体悬浮液，取冷冻保存含有质粒的大肠杆菌菌种接种培养后提取质粒DNA，并配制酶－质粒混合液，将原生质体悬浮液与酶－质粒混合液混匀，培养筛选得到突变体后再经不含潮霉素和含潮霉素的PDA上培养，筛选获得稳定的玉米弯孢叶斑病菌突变菌株。本发明采用限制性内切酶介导的基因整合技术，将质粒DNA与制备的木霉菌原生质体混合，并在限制性内切酶的作用下，使外源线性质粒片段插入染色体组诱导插入突变。获得的突变株为筛选弱致病性弯孢菌株提供了丰富的筛选菌源，可用于克隆玉米弯孢菌致病性相关基因及研究玉米弯孢菌菌株致病机理。
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公开(公告)号：CN101195807A
公开(公告)日：2008-06-11
申请号：CN200710173283.X
申请日：2007-12-27
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种木霉菌突变株分生孢子的固体发酵方法。首先对限制性内切酶介导基因整合技术构建的木霉菌突变株进行稳定性检测，然后筛选出产孢量大、且对多种病原菌有较强抑制作用的生物工程突变株。单孢分离后转移至试管斜面内作母菌种，进而经马铃薯葡萄糖琼脂培养基、发酵种子液培养基培养获得二级菌种，再经优化的固体发酵方法使其产生分生孢子。发酵所用的固体发酵培养料由麦麸、腐殖酸钠、玉米渣、稻壳、稻草粉构成，通过优化固料配比和发酵条件，发酵所获得的孢子－基质混合物经干燥后可直接用于生产。本发明方法可产生大量的分生孢子，可直接用于保护地蔬菜生产，对由镰刀菌、立枯丝核菌等引起的土传病害有良好的防治效果。
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公开(公告)号：CN101665375B
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN200910195134.2
申请日：2009-09-04
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种农业技术领域的秸秆菌肥的制备方法，包括如下步骤：将木霉菌(Trichoderma spp.)接种于PDA培养基上培养，之后接入种子菌培养基发酵，得种子菌发酵液；将种子菌发酵液接种于固体培养基中，发酵，得固体发酵物，干燥；将作物秸秆与干燥后的固体发酵物混合，发酵，获得秸秆菌肥。本发明解决了传统秸秆堆肥制备时间过长，功能单一、质量难控制等问题，制备得到了一种秸秆菌肥，实现有氧发酵生产秸秆肥。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101186882A
公开(公告)日：2008-05-28
申请号：CN200710172602.5
申请日：2007-12-20
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种从分子改良木霉菌分离可诱导黄瓜抗白粉病代谢物的方法，利用限制性内切酶介导的基因整合技术，通过制备木霉菌菌株原生质体及进行质粒提取，构建木霉菌转化子，继而将转化子培养、发酵，并从发酵液中筛选出具有系统诱导黄瓜抗白粉病的木霉转化子胞外代谢物。本发明的木霉菌转化子胞外代谢物能克服活体木霉菌诱导抗性效果不稳定的缺点，不仅对白粉病具有较明显的防治效果，还能促进黄瓜幼苗的生长，为绿色分子农药创制提供了一种从木霉菌快速、高效筛选新型微生物源农药先导化合物的有效方法。
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公开(公告)号：CN101386844A
公开(公告)日：2009-03-18
申请号：CN200810201936.5
申请日：2008-10-30
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种木霉磷脂酶A2及表达该酶的基因，属于农业生物技术领域。本发明提供了一个木霉磷脂酶A2(PLA2)氨基酸和核苷酸序列，构建了该酶高效的原核表达，纯化体系；构建了该基因缺失突变体，并使用其防治玉米弯胞叶斑病，取得良好的防治效果。本发明首次在丝状真菌中获得了木霉磷脂酶A2，克隆了表达该酶的基因，提供的获得该酶的高效方法为生产酶制剂提供了可能，该酶所具有的酯酶和磷脂酶A2双功能预示该酶在工业催化上有良好的应用价值；该基因缺失突变子防治玉米弯胞叶斑病的作用为防治玉米弯胞叶斑病的提供了新的应用，可大大减轻玉米弯胞叶斑病病害，提高玉米产量。
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公开(公告)号：CN101665375A
公开(公告)日：2010-03-10
申请号：CN200910195134.2
申请日：2009-09-04
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种农业技术领域的秸秆菌肥的制备方法，包括如下步骤：将木霉菌(Trichoderma spp.)接种于PDA培养基上培养，之后接入种子菌培养基发酵，得种子菌发酵液；将种子菌发酵液接种于固体培养基中，发酵，得固体发酵物，干燥；将作物秸秆与干燥后的固体发酵物混合，发酵，获得秸秆菌肥。本发明解决了传统秸秆堆肥制备时间过长，功能单一、质量难控制等问题，制备得到了一种秸秆菌肥，实现有氧发酵生产秸秆肥。
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公开(公告)号：CN101491235A
公开(公告)日：2009-07-29
申请号：CN200910046697.5
申请日：2009-02-26
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种利用取样器对小型害虫进行诱集监测的方法，属于农业技术领域。本发明根据害虫趋黄性和迁飞习性及其与寄主植物的相互关系，利用白铁皮、半透明塑料盆、透明塑料瓶等材料制作害虫取样器。将白铁皮卷成圆筒罩住单株寄主植物，半透明塑料盆扣在铁筒上并在塑料盆盆底中央开一圆孔，将置入黄色粘纸的透明塑料瓶瓶口朝下接入盆底中央的圆孔，即可对害虫的发生数量进行监测。本发明可以对单株寄主植物上粉虱、蚜虫等小型害虫成虫的绝对数量进行监测，在田间、温室均可使用，易操作，可以获得准确的调查数据，并根据这些数据准确监测害虫发生数量的季节动态，为目标害虫的综合防治技术的实施提供理论依据。
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公开(公告)号：CN1916157A
公开(公告)日：2007-02-21
申请号：CN200610030903.X
申请日：2006-09-07
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种降解氰化物污染木霉菌转化子的筛选与固定化制备方法，首先利用限制性内切酶介导基因整合技术构建木霉菌突变株，通过对出发菌株及其转化子间氰化物降解酶系的活性比较分析，筛选出对氰化物高降解活性的木霉菌转化子，然后在确定了固相化过程中海藻酸钠和CaCl2浓度、菌丝包埋量、固定化时间、降解温度与时间等因素的基础上，使用海藻酸钠作为载体包埋转化子细胞，制备固定化细胞小球，即为固定化木霉菌转化子。利用本发明制备的木霉菌转化子对含氰废水进行修复，其对氰化物的降解速度比游离细胞的降解速度要快，而且方便回收及再利用。
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