本发明涉及检测pH荧光传感器技术领域，尤其涉及一种检测pH荧光传感器化合物及其制备与应用，将4‑（二乙基氨基）水杨醛、3,5‑二甲基‑4‑硝基异恶唑及哌啶溶于无水乙醇进行回流，减压蒸发除去溶剂后，用二氯甲烷溶解后经过柱层析纯化，得到粉红色固体，即为所述(E)‑5‑二乙氨基‑2‑(2‑(3‑甲基‑4‑硝基异恶唑‑5‑基)乙烯基)苯酚化合物。本发明所述的荧光传感器，与现有的pH荧光传感器相比，由于能对碱性体系响应表现出非常高的灵敏度，不受常见活性物质等背景的干扰，水溶性好，细胞毒性等方面性能优异。鉴于此，可作为pH传感器在生物分析、细胞成像、靶向细胞器、药物传递与释放中具有良好的应用前景。