本发明属于多糖类分析检测领域，涉及一种测定透明质酸钠含量的方法。将待检测透明质酸钠样品在酸性条件下进行水解，检测水解产物的含量，转化计算得出透明质酸钠的含量。该测定方法采用灵敏度高、检出限低、准确性好、分离效果明显的高效液相色谱法测定单糖含量，并结合采用通用型蒸发光散射检测器，克服了透明质酸本身不具有发光基团，紫外吸收弱，不易被检测的困难，准确度高，简便易操作，不受透明质酸钠分子量大小的影响，应用性强。可为实现透明质酸相关产品的质量控制提供参考依据，对于推动透明质酸产业发展具有重要的理论和现实意义。