本发明公开了一种检测薏苡叶斑病菌的DPO‑PCR引物及方法，提供一种薏苡叶斑病菌高度特异的DPO‑PCR检测引物以及建立了基于琼脂糖凝胶电泳判定的DPO‑PCR检测。本发明设计一对双启动寡核苷酸引物（dual‑priming oligonucleotide，DPO）PCR检测引物，对带菌的薏苡叶片和种子进行检测，以扩增产物有无和片段大小来确定病原菌是否为薏苡叶斑病。针对现有技术中薏苡叶斑病菌的生物学检测方法所需周期长、检测方法特异性差，灵敏度低的问题，本发明提供的DPO‑PCR检测方法较传统检测方法相比，操作简便、结果准确。