本发明提出了一种用于检测羧酸酯酶的荧光探针及其制备方法与专用检测试剂盒，该荧光探针为2‑[2‑4‑乙酰氧基‑苯基)‑乙烯基]‑3‑乙基‑1,1‑二甲基‑1H‑苯并[e]吲哚，本发明基于羧酸酯酶可与乙酰氧基发生水解反应，将乙酰氧基作为特异性响应基团，半花菁类染料作为荧光团，半花菁类染料荧光团自身具有良好的荧光性质，具有较长的发射波长，设计了一种半花菁类荧光探针，本设计的试剂盒与羧酸酯酶反应后溶液呈现粉红色并且发出强烈的荧光，灵敏度高，该显色反应仅在羧酸酯酶存在的条件下发生，其他常见的活性氧、氨基酸、酶类物种不产生干扰。