本发明涉及一种牛多杀性巴氏杆菌病二价灭活疫苗，属于兽用生物制品制备技术领域。本发明的二价灭活疫苗由抗原和疫苗佐剂组成，其中抗原为牛多杀性巴氏杆菌荚膜A型Pm‑TJ株和牛多杀性巴氏杆菌荚膜B型C45‑2株。本发明制备的二价灭活疫苗采用了浓缩纯化工艺，并优化了牛多杀性巴氏杆菌荚膜B型C45‑2株的发酵培养工艺，使发酵时间缩短一半以上，提高生产效率，本发明的二价灭活疫苗可通过一针免疫同时预防由牛多杀性巴氏杆菌感染引起的牛纤维素性化脓性肺炎和牛出血性败血症，具有安全可靠、免疫效果良好的特点。