本发明公开了一种检测乙型脑炎病毒的环介导等温扩增试剂盒。本发明试剂盒含有RNA提取试剂，等温扩增反应管，1000倍荧光染料。每支等温扩增反应管中包含以下组分：KCl、Tris-Cl、(NH4)2SO4、MgSO4、Triton X-100、引物F3与B3各20pmol、引物FIP与BIP各50pmol、引物FLP与BLP各40pmol、Betaine 1.1mM、AMV反转录酶5U、Bst DNA聚合酶8U、dNTP 0.8mM、RNA酶抑制剂40U。本发明检测乙型脑炎病毒的试剂盒特异性强，灵敏度高，操作简便，检测时间短，结果易于判断，不需PCR仪等贵重仪器，适合于实验室以及基层单位应用。