本发明公开了一种检测鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽流感病毒和鸡传染性法氏囊病病毒的血清抗体的可视化蛋白芯片，包括以下方法制备得到：将上述4种病毒全蛋白分别进行纯化，稀释；将阳性对照血清，阴性对照与4种病毒蛋白分别点样于芯片载体上；干燥，固定，封闭，洗涤，即得。本发明以纯化的全病毒蛋白作为捕获抗原检测鸡血清中的病毒特异抗体，简化了制备工艺，降低了生产的成本，有较好的特异性，无交叉，结果可信度高，具有快速、简便、灵敏度高、特异性好等优点。在血清稀释6400倍时仍可检出抗体，灵敏度是传统的AGP检测方法的400倍。对现地血清样品进行检测，本发明蛋白芯片的检出率明显高于传统的AGP方法。